Pengantar
Semua hewan, tumbuhan, jamur, dan protista — yang secara kolektif membentuk domain kehidupan yang disebut eukariota — memiliki genom dengan ciri khas yang telah membingungkan para peneliti selama hampir setengah abad: gen mereka terfragmentasi.
Dalam DNA mereka, informasi tentang cara membuat protein tidak terurai dalam rangkaian basa yang koheren dan panjang. Alih-alih, gen dipecah menjadi segmen-segmen, dengan urutan intervensi, atau "intron", yang memisahkan ekson yang menyandikan bit protein. Ketika eukariota mengekspresikan gen mereka, sel mereka harus menyambung keluar RNA dari intron dan menjahit bersama RNA dari ekson untuk merekonstruksi resep protein mereka.
Misteri mengapa eukariota mengandalkan sistem barok ini diperdalam dengan penemuan bahwa berbagai cabang pohon keluarga eukariotik sangat bervariasi dalam kelimpahan intronnya. Gen ragi, misalnya, memiliki sangat sedikit intron, tetapi tanaman darat memiliki banyak intron. Intron membentuk hampir 25% DNA manusia. Bagaimana variasi frekuensi intron yang luar biasa dan penuh teka-teki ini berevolusi telah menimbulkan perdebatan di antara para ilmuwan selama beberapa dekade.
Jawaban akhirnya mungkin muncul, bagaimanapun, dari studi terbaru tentang elemen genetik yang disebut introner yang oleh beberapa ilmuwan dianggap sebagai sejenis parasit genomik. Potongan-potongan DNA ini dapat menyelinap ke dalam genom dan berkembang biak di sana, meninggalkan banyak sekali intron di belakangnya. November lalu, para peneliti mempresentasikan bukti bahwa intron telah melakukan ini pada eukariota yang beragam sepanjang evolusi. Selain itu, mereka menunjukkan bahwa introner dapat menjelaskan mengapa perolehan eksplosif dalam intron tampaknya sangat umum dalam bentuk kehidupan akuatik.
Temuan mereka "mungkin menjelaskan sebagian besar perolehan intron," kata Russ Corbett-Detig, penulis senior makalah baru dan peneliti genomik evolusioner di University of California, Santa Cruz.
Teka-teki Genom Eukariotik
Karena intron polka-dotting DNA mereka, jika gen eukariota diterjemahkan langsung menjadi protein, molekul yang dihasilkan biasanya akan menjadi sampah nonfungsional. Oleh karena itu, semua sel eukariotik dilengkapi dengan gunting genetik khusus yang disebut spliceosom. Kompleks protein ini mengenali urutan khas yang mengapit intron RNA dan menghapusnya dari transkrip RNA awal gen aktif. Kemudian mereka menyatukan segmen pengkodean dari ekson untuk menghasilkan messenger RNA yang dapat diterjemahkan menjadi protein yang berfungsi.
(Beberapa prokariota juga memiliki intron, tetapi mereka memiliki cara untuk mengatasinya yang tidak melibatkan spliceosom. Misalnya, beberapa intron mereka "menyambung sendiri" dan secara otomatis melepaskan diri dari RNA.)
Mengapa seleksi alam pada eukariota menyukai intron yang perlu dihilangkan oleh spliceosom tidak diketahui. Tetapi kuncinya mungkin bahwa intron semacam itu memungkinkan penyambungan alternatif, sebuah fenomena yang secara dramatis meningkatkan keragaman produk yang dapat muncul dari satu gen. Ketika RNA intron dipotong, urutan RNA ekson dapat dirangkai dalam urutan baru untuk membuat protein yang sedikit berbeda, jelas Corbett-Detig.
Terlepas dari pengaruh intron pada biologi dan kompleksitas genetik organisme eukariotik, asal usul evolusinya tetap tidak jelas. Sejak penemuan intron pada tahun 1977, para peneliti telah mengembangkan banyak teori tentang dari mana urutan intrusi ini berasal. Beberapa mekanisme yang dapat membuat intron telah diidentifikasi, dan semuanya mungkin telah menyumbangkan beberapa intron pada eukariota. Tetapi sulit untuk mengatakan yang mana jika ada di antara mereka yang dapat menjelaskan dari mana sebagian besar intron berasal.
Selain itu, misteri seputar asal-usul intron semakin dalam mengingat variasi ekstrim di mana intron cenderung muncul di seluruh pohon kehidupan eukariota. Beberapa garis keturunan sangat berat dengan mereka dengan cara yang menunjukkan banjir tiba-tiba dengan intron selama sejarah evolusi mereka. Ketika Anda memeriksa pohon kehidupan dan berapa banyak intron yang ditemukan di setiap ujung pohon, Corbett-Detig berkata, "Anda dapat mengetahui dengan cukup cepat bahwa pasti ada cabang tertentu di mana satu ton intron berevolusi sekaligus."
Salah satu penjelasan yang mungkin untuk infus intron yang eksplosif itu melibatkan jenis elemen genetik yang tidak biasa yang dikenal sebagai introner. Pertama kali dijelaskan pada tahun 2009 di alga hijau uniseluler Mikromonas, intron kemudian muncul dalam genom beberapa ganggang lain, beberapa spesies jamur, organisme laut kecil yang disebut dinoflagellata dan invertebrata sederhana yang disebut tunicata.
Ciri khas introner adalah mereka menciptakan intron. Introners menyalin dan menempelkan diri mereka ke dalam bentangan DNA pengkodean yang menawarkan situs penyambungan yang sesuai. Kemudian mereka melanjutkan, meninggalkan sekuens intron spesifik yang diapit oleh situs splicing, yang membagi DNA penyandi menjadi dua ekson. Proses ini dapat diulang dalam skala besar di seluruh genom. Pada jamur, misalnya, introner tampaknya bertanggung jawab atas sebagian besar perolehan intron setidaknya selama 100,000 tahun terakhir.
Pengantar
Bagaimana intron mencapai hal ini menjadi lebih jelas pada tahun 2016, ketika para peneliti menemukan bahwa intron dalam dua spesies alga memiliki kemiripan yang kuat dengan transposon DNA, anggota keluarga besar elemen genetik yang disebut elemen transposable atau “gen pelompat”. Transposon juga menyisipkan sejumlah besar salinan dirinya ke dalam genom.
Kesejajaran antara introner dan transposon sangat menyarankan jawaban yang mungkin untuk misteri dari mana sebagian besar intron berasal. Introner dapat menyebabkan intron meledak dalam genom dalam jumlah besar, yang mungkin menjelaskan pola kemunculannya di berbagai eukariota. Tangkapannya adalah bahwa introner hanya diketahui ada di beberapa organisme.
“Apakah ada yang mencari di tempat lain?” tanya Landen Gozashti, yang sedang melakukan penelitian tentang genomik evolusioner di Santa Cruz saat membaca studi alga tahun 2016. Melihat literatur ilmiah menunjukkan bahwa tidak ada kelompok yang menerbitkan data tentang intron di tempat lain di antara eukariota. Gozashti, sekarang di Universitas Harvard, Corbett-Detig dan rekan mereka berusaha untuk memperbaikinya.
Diam-diam, Penjajah Berlimpah
Tim secara sistematis memindai lebih dari 3,300 genom dari seluruh keragaman eukariotik - mulai dari domba hingga sequoia hingga protista bersilia. Mereka menggunakan serangkaian filter komputasi untuk mengidentifikasi calon intron, mencari intron dengan urutan yang sangat mirip dan menghilangkan positif palsu. Pada akhirnya, mereka menemukan ribuan intron berasal dari intron dalam 175 genom tersebut, sekitar 5% dari total, dari 48 spesies berbeda.
Lima persen mungkin tampak seperti sepotong kecil kue eukariotik. Tetapi ketika mutasi menumpuk di introner dari waktu ke waktu, kesamaan urutan antara salinan memburuk sampai tidak mungkin lagi untuk mengatakan bahwa mereka berasal dari sumber yang sama. Silsilah evolusioner dari banyak spesies yang hidup saat ini mungkin telah mengalami banjir intron, tetapi masuknya intron apa pun yang terjadi lebih dari beberapa juta tahun lalu tidak akan terdeteksi. Oleh karena itu, hasil 5% mengisyaratkan bahwa introner mungkin jauh lebih umum.
Sebagai parasit genomik, introner mungkin mencapai kesuksesannya melalui sembunyi-sembunyi. Parasit yang baik tidak bisa menarik terlalu banyak perhatian pada dirinya sendiri. Jika introner mengganggu aktivitas gen yang tertanam di dalamnya, itu dapat membahayakan organisme inang, dan seleksi alam dapat menghilangkan parasit genomik sama sekali. Jadi unsur-unsur ini terus berkembang menjadi "senetral mungkin" dalam pengaruhnya, kata Valentina Peona, ahli genom komparatif di Universitas Uppsala.
Gozashti, Corbett-Detig, dan rekan mereka menemukan bagaimana introner mahir menyelinap di bawah radar ketika mereka memperkirakan efisiensi penyambungan introner, yang mencerminkan kemampuan mereka untuk menghindari gangguan fungsi gen inang. "Intron sebenarnya disambung lebih baik daripada intron lainnya," kata Gozashti. "Hal-hal ini menjadi sangat bagus dalam hal itu."
Sambungan Perairan
Karya Gozashti dan rekan-rekannya membuktikan bahwa introner tidak terdistribusi secara merata di antara eukariota. Misalnya, introner lebih dari enam kali lebih mungkin muncul dalam genom organisme akuatik dibandingkan dengan organisme terestrial. Selain itu, hampir tiga perempat genom dari spesies air yang mengandung introner menampung banyak keluarga introner.
Corbett-Detig, Gozashti dan rekan mereka berpendapat bahwa pola ini dapat dijelaskan dengan transfer gen horizontal, transfer urutan genetik dari satu spesies ke spesies lainnya. Transfer gen yang tidak ortodoks ini cenderung terjadi di lingkungan perairan atau dalam contoh hubungan antarspesies yang dekat, seperti antara inang dan parasit, jelas Saima Shahid, seorang ahli biologi tumbuhan di Oklahoma State University.
Lingkungan perairan mungkin mendorong transfer gen horizontal karena media berair bisa menjadi sup asam nukleat yang ditumpahkan oleh spesies yang tak terhitung jumlahnya. Organisme bersel tunggal mengayuh di dalam rebusan ini, jadi mudah bagi mereka untuk mengambil DNA asing yang mungkin dimasukkan ke dalamnya. Tetapi bahkan spesies multisel yang jauh lebih kompleks bertelur atau membuahinya di dalam air, menciptakan peluang bagi DNA untuk ditransfer ke dalam garis keturunan mereka.
Pengantar
Clement Gilbert, ahli genomik evolusioner di Universitas Paris-Saclay, berpendapat bahwa bias akuatik pada intron adalah gema dari apa yang ditemukan kelompoknya dalam peristiwa transfer gen horizontal. Pada tahun 2020, pekerjaan mereka mengungkap hampir 1,000 transfer horizontal berbeda yang melibatkan transposon yang terjadi di lebih dari 300 genom vertebrata. Sebagian besar perpindahan ini terjadi pada ikan teleost, kata Gilbert.
Jika intron menemukan jalan mereka ke inang terutama melalui transfer gen horizontal di lingkungan akuatik, itu bisa menjelaskan pola tidak teratur dari perolehan intron besar pada eukariota. Organisme terestrial tidak mungkin memiliki semburan intron yang sama, kata Corbett-Detig, karena perpindahan horizontal jauh lebih jarang terjadi di antara mereka. Intron yang ditransfer dapat bertahan dalam genom selama jutaan tahun sebagai suvenir permanen dari kehidupan leluhur di laut dan sikat yang menentukan dengan parasit genom yang cekatan.
Introner yang bertindak sebagai elemen invasif asing dalam genom juga bisa menjadi penjelasan mengapa mereka memasukkan intron secara tiba-tiba dan eksplosif. Mekanisme pertahanan yang mungkin digunakan genom untuk menekan beban transposon yang diwariskan mungkin tidak bekerja pada elemen genetik asing yang datang melalui transfer horizontal.
“Sekarang elemen itu bisa menggila di seluruh genom,” kata Gozashti. Bahkan jika intron pada awalnya berbahaya, para peneliti berhipotesis bahwa tekanan selektif dapat segera menjinakkannya dengan memotongnya dari RNA.
Meskipun transfer gen horizontal dan introner memiliki hubungan yang sama dengan lingkungan akuatik, temuan tersebut belum menunjukkan secara pasti bahwa dari sanalah introner berasal. Tetapi penemuan pengaruh luas para intron menantang beberapa teori tentang bagaimana genom - terutama genom eukariotik - telah berevolusi.
Gema di Host
Meluasnya perolehan intron baru-baru ini dapat bertindak sebagai penyeimbang beberapa gagasan tentang evolusi kompleksitas genomik. Salah satu contohnya melibatkan teori evolusi intron yang dikembangkan oleh Michael Lynch dari Arizona State University pada tahun 2002. Model menunjukkan bahwa pada spesies dengan populasi pemuliaan kecil, seleksi alam dapat menjadi kurang efisien dalam menghilangkan gen yang tidak membantu. Lynch mengusulkan bahwa spesies tersebut akan cenderung menumpuk sampah genetik nonfungsional dalam genom mereka. Sebaliknya, spesies dengan populasi perkembangbiakan yang sangat besar seharusnya tidak mendapatkan banyak intron sama sekali.
Tapi Gozashti, Corbett-Detig dan rekan penulis menemukan sebaliknya. Beberapa protista laut dengan populasi pemuliaan raksasa memiliki ratusan atau ribuan intron. Sebaliknya, penyerbu jarang terjadi pada hewan dan tidak ada pada tumbuhan darat — kedua kelompok dengan populasi perkembangbiakan yang jauh lebih kecil.
Perlombaan senjata evolusioner antara elemen genetik yang menyerang dan inang mungkin memiliki andil dalam menghasilkan genom yang lebih rumit. Elemen parasit berada dalam "konflik terus-menerus" dengan elemen genetik milik inang, jelas Gozashti, karena mereka bersaing untuk ruang genomik. “Semua bagian yang bergerak ini terus mendorong satu sama lain untuk berevolusi,” katanya.
Itu menimbulkan pertanyaan tentang apa arti perolehan intron bagi biologi fungsional organisme tempat mereka muncul.
Cedric Feschotte, seorang ahli biologi molekuler di Universitas Cornell, menduga akan menarik untuk membandingkan dua spesies yang berkerabat dekat, hanya satu yang mengalami kawanan intron dalam sejarah evolusi baru-baru ini. Perbandingan tersebut mungkin membantu mengungkapkan bagaimana masuknya intron dapat mendorong munculnya gen baru. “Karena kita tahu bahwa memasukkan intron juga dapat memfasilitasi penangkapan ekson tambahan — jadi hal yang benar-benar baru,” katanya.
Demikian pula, Feschotte berpikir bahwa banyaknya intron dapat membantu mendorong evolusi keluarga gen yang dapat berubah dengan cepat. Diisi dengan intron baru, gen tersebut dapat mengkooptasi variabilitas baru yang diaktifkan oleh penyambungan alternatif.
Gen yang berkembang pesat seperti itu tersebar luas di alam. Spesies berbisa, misalnya, seringkali perlu mencampurkan campuran kompleks peptida dalam racunnya pada tingkat genetik untuk beradaptasi dengan mangsa atau pemangsa yang berbeda. Kemampuan sistem kekebalan untuk menghasilkan reseptor molekuler yang beragam tanpa henti juga bergantung pada gen yang dapat mengatur ulang dan menggabungkan kembali dengan cepat.
Peona memperingatkan, bagaimanapun, bahwa meskipun introner dapat memberikan manfaat bagi suatu organisme, mereka mungkin juga benar-benar netral. Mereka harus dianggap “tidak bersalah sampai terbukti bersalah dalam fungsi atau apa pun.”
“Salah satu hal selanjutnya adalah melihat data metagenomik untuk mencoba menemukan kasus yang benar-benar merupakan transfer horizontal yang jelas dengan introner yang sama persis dalam dua spesies berbeda,” kata Corbett-Detig. Menemukan potongan teka-teki ini akan membantu menyempurnakan cerita lengkap dari mana sebagian besar intron eukariota berasal.
Irina Arkhipova, ahli genetika evolusi molekuler di Laboratorium Biologi Kelautan Universitas Chicago, tertarik untuk mengetahui lebih banyak tentang bagaimana introner menyebar melalui genom dalam skala besar. "Itu tidak meninggalkan jejak enzim yang bertanggung jawab atas ledakan mobilitas besar-besaran ini - itu sebuah misteri," katanya. "Pada dasarnya Anda harus menangkapnya saat dia masih bergerak."
Bagi Gozashti, penemuan introner pada eukariota yang begitu luas memberikan pelajaran tentang bagaimana mendekati pertanyaan mendasar tentang sifat kehidupan eukariotik: Berpikir luas. Studi sering berfokus pada bagian dari keanekaragaman hayati yang diwakili oleh hewan dan tumbuhan darat. Tapi untuk memahami pola penting dari informasi genomik yang mendasari semua kehidupan, "kita perlu mengurutkan lebih banyak keragaman eukariotik, lebih banyak garis keturunan protista di mana kita tidak tahu apa-apa tentang bagaimana mereka berevolusi," katanya. “Seandainya kita baru saja mempelajari tumbuhan dan hewan darat, kita tidak akan pernah menemukan penyerbu.”
Catatan editor: Gozashti adalah seorang mahasiswa pascasarjana di laboratorium Hopi Hoekstra, yang menjabat sebagai dewan penasehat untuk Quanta.
- Konten Bertenaga SEO & Distribusi PR. Dapatkan Amplifikasi Hari Ini.
- Platoblockchain. Intelijen Metaverse Web3. Pengetahuan Diperkuat. Akses Di Sini.
- Sumber: https://www.quantamagazine.org/how-a-dna-parasite-may-have-fragmented-our-genes-20230330/
- :adalah
- ][P
- $NAIK
- 000
- 1
- 100
- 2016
- 2020
- a
- kemampuan
- Tentang Kami
- absen
- Mutlak
- kelimpahan
- menyelesaikan
- Akun
- Mengumpulkan
- dicapai
- di seluruh
- Bertindak
- aktif
- kegiatan
- sebenarnya
- menyesuaikan
- Tambahan
- laporan
- Dewan Penasehat
- Semua
- alternatif
- Meskipun
- antara
- dan
- hewan
- Lain
- menjawab
- siapapun
- di manapun
- muncul
- pendekatan
- sesuai
- ADALAH
- arizona
- sekitar
- tiba
- AS
- Asosiasi
- At
- perhatian
- penulis
- secara otomatis
- Pada dasarnya
- BE
- karena
- menjadi
- di belakang
- Manfaat
- Lebih baik
- antara
- prasangka
- Besar
- biologi
- papan
- cabang
- luasnya
- Membawa
- secara luas
- membangun
- beban
- by
- california
- bernama
- CAN
- menangkap
- kasus
- gulat
- Menyebabkan
- Sel
- Abad
- tertentu
- menantang
- perubahan
- Chicago
- jelas
- lebih jelas
- Penyelesaian
- rapat
- Pengkodean
- KOHEREN
- rekan
- kolektif
- bagaimana
- Umum
- membandingkan
- perbandingan
- bersaing
- sama sekali
- kompleks
- kompleksitas
- rumit
- koneksi
- dianggap
- terus-menerus
- mengandung
- terus-menerus
- kontras
- berkontribusi
- bisa
- membuat
- membuat
- pemotongan
- data
- perdebatan
- dekade
- Pertahanan
- tergantung
- Berasal
- dijelaskan
- dikembangkan
- berbeda
- langsung
- penemuan
- berbeda
- didistribusikan
- beberapa
- Keragaman
- dna
- melakukan
- domain
- Dont
- secara dramatis
- seri
- mendorong
- penggerak
- selama
- setiap
- gema
- efisiensi
- efisien
- Telur
- elemen
- elemen
- di tempat lain
- tertanam
- munculnya
- muncul
- diaktifkan
- tanpa henti
- Lingkungan Hidup
- lingkungan
- sama
- lengkap
- diperkirakan
- Bahkan
- peristiwa
- segala sesuatu
- bukti
- evolusi
- berkembang
- berkembang
- berkembang
- contoh
- berpengalaman
- Menjelaskan
- menjelaskan
- penjelasan
- ekspres
- ekstrim
- memudahkan
- keluarga
- keluarga
- Fitur
- beberapa
- Angka
- filter
- Akhirnya
- Menemukan
- temuan
- Pertama
- Ikan
- Fokus
- Untuk
- asing
- bentuk
- ditemukan
- terfragmentasi
- Frekuensi
- dari
- penuh
- fungsi
- fungsionil
- mendasar
- Mendapatkan
- mendapatkan
- Keuntungan
- menghasilkan
- menghasilkan
- genomik
- GitHub
- Go
- baik
- lulus
- besar
- Hijau
- Kelompok
- Grup
- berdosa
- Setengah
- tangan
- terjadi
- terjadi
- Sulit
- berbahaya
- harvard
- Universitas Harvard
- Memiliki
- berat
- membantu
- petunjuk
- sejarah
- memegang
- Horisontal
- tuan rumah
- host
- Seterpercayaapakah Olymp Trade? Kesimpulan
- How To
- Namun
- http
- HTTPS
- besar
- manusia
- Ratusan
- ide-ide
- diidentifikasi
- mengenali
- Sistem kekebalan tubuh
- penting
- in
- Tergabung
- Meningkatkan
- mempengaruhi
- arus
- informasi
- mulanya
- contoh
- sebagai gantinya
- tertarik
- menarik
- campur tangan
- melibatkan
- IT
- NYA
- Diri
- kunci
- Jenis
- Tahu
- Mengetahui
- dikenal
- laboratorium
- Tanah
- besar
- lebih besar
- Terakhir
- meninggalkan
- pelajaran
- Tingkat
- Hidup
- cahaya
- 'like'
- Mungkin
- literatur
- Panjang
- lagi
- melihat
- mencari
- Mayoritas
- membuat
- banyak
- besar-besaran
- medium
- Anggota
- kurir
- mungkin
- juta
- jutaan
- mobilitas
- model
- molekuler
- lebih
- Selain itu
- paling
- pindah
- bergerak
- beberapa
- Misteri
- Alam
- Alam
- hampir
- Perlu
- Netral
- New
- berikutnya
- November
- nomor
- banyak sekali
- terjadi
- of
- menawarkan
- Oklahoma
- on
- ONE
- Peluang
- seberang
- urutan
- Lainnya
- sendiri
- kertas
- Parallels
- khususnya
- pola
- pola
- aneh
- persen
- permanen
- gejala
- bagian
- potongan-potongan
- tanaman
- plato
- Kecerdasan Data Plato
- Data Plato
- Titik
- populasi
- mungkin
- potensi
- disajikan
- cukup
- terutama
- proses
- menghasilkan
- Produk
- mendorong
- diusulkan
- Protein
- Protein
- terbukti
- terbukti
- memberikan
- diterbitkan
- teka-teki
- Majalah kuantitas
- pertanyaan
- Pertanyaan
- segera
- Ras
- radar
- meningkatkan
- jarak
- cepat
- LANGKA
- Baca
- alasan
- baru
- mengenali
- mencerminkan
- terkait
- tetap
- Remix
- menghapus
- Dihapus
- menghapus
- ulang
- diwakili
- penelitian
- peneliti
- peneliti
- tanggung jawab
- mengakibatkan
- dihasilkan
- mengungkapkan
- RNA
- Tersebut
- sama
- Santa
- Skala
- sisik
- ilmiah
- ilmuwan
- SEA
- segmen
- seleksi
- selektif
- senior
- Urutan
- Seri
- melayani
- set
- beberapa
- Share
- domba
- harus
- Menunjukkan
- mirip
- kesamaan
- Sederhana
- sejak
- tunggal
- situs web
- Situs
- ENAM
- sedikit berbeda
- tergelincir
- kecil
- lebih kecil
- So
- beberapa
- sumber
- Space
- khusus
- tertentu
- membagi
- Berpisah
- menyebarkan
- Negara
- Stealth
- Masih
- Cerita
- kuat
- sangat
- mahasiswa
- belajar
- studi
- Belajar
- Kemudian
- sukses
- seperti itu
- tiba-tiba
- sistem
- Mengambil
- tim
- terestrial
- bahwa
- Grafik
- informasi
- mereka
- Mereka
- diri
- karena itu
- Ini
- hal
- berpikir
- ribuan
- Melalui
- di seluruh
- waktu
- kali
- ujung
- untuk
- hari ini
- bersama
- ton
- terlalu
- Total
- SAMA SEKALI
- Jejak
- transfer
- ditransfer
- transfer
- dahsyat
- Berbalik
- khas
- di mana-mana
- bawah
- pokok
- memahami
- tidak biasa
- universitas
- University of California
- University of Chicago
- menggunakan
- berbagai
- Luas
- Peringatkan
- air
- Cara..
- cara
- webp
- Apa
- yang
- sementara
- SIAPA
- lebar
- Rentang luas
- sangat
- tersebar luas
- akan
- dengan
- Kerja
- kerja
- akan
- tahun
- Kamu
- zephyrnet.dll