«ساعت‌های اپی ژنتیک» سن واقعی حیوانات را پیش‌بینی می‌کنند

این بار یک سال پیش، استیو هوروات به دنبال DNA پانگولین بود. مورچه خوار فلس دار باستانی اولین مورد برای مجموعه او بود که در آن زمان حدود 200 پستاندار نیرو داشت. او به یاد می آورد: «من هیچ کدام از این دستورات را نداشتم، به همین دلیل به شدت آنها را می خواستم.

از تابستان 2017، هوروات، که تا همین اواخر یک محقق ضد پیری در دانشگاه کالیفرنیا، لس آنجلس، 10 ساعت در روز را صرف نوشتن ایمیل به باغ وحش ها، موزه ها، آکواریوم ها و آزمایشگاه ها کرده است. او در مذاکراتی درباره خفاش ها و شیاطین تاسمانی برای دیدار با نگهبانان آنها شرکت کرده است. او به گوشه‌های دور دنیا دست دراز کرده است و برای DNA روباه‌های پرنده، میمون‌های سرخ‌پوش، خوک‌های کوچک و نهنگ‌های کمان‌دار التماس می‌کند.

او گفت که با این مجموعه عظیم نمونه‌ها، ساعت‌های محاسباتی ساخته است که می‌تواند سن موجوداتی را به گونه‌ای متفاوت محاسبه کند که می‌تواند با نگاه کردن به دی‌ان‌ای آنها، گورخرها، خوک‌ها و «هر نهنگی را که می‌توانید نام ببرید». اما آن‌ها فقط گام‌هایی به سوی تکمیل مهتاب بلندپروازانه هوروات از یک پروژه بودند: یک ساعت جهانی که می‌تواند سن بیولوژیکی هر پستانداری را اندازه‌گیری کند.

اندازه گیری سن ممکن است به نظر سخت تر از استفاده از نزدیک ترین ساعت یا تقویم نباشد. اما سن تقویمی یک معیار ناقص است زیرا برخی از افراد و بافت ها اثرات سن را سریعتر از دیگران نشان می دهند. برای چندین دهه، دانشمندان به دنبال روشی عینی و همه کاره برای اندازه گیری پیری بیولوژیکی، تغییرات عملکرد سالم در طول زمان بودند. هوروث، که امسال UCLA را ترک کرد تا محقق اصلی در Altos Labs شود، گفت: «شما می‌خواهید یک نشانگر زیستی داشته باشید که سن را در بافت‌ها و انواع سلول‌های مختلف اندازه‌گیری کند.»

هوروات و همکارانش نسخه‌ای از ساعت پان پستانداران را در اوایل امسال تکمیل کردند. اکنون او و سایر محققان امیدوارند فرآیندهای مولکولی مشترک موجودات مختلف را شناسایی کنند که چنین ساعتی را ممکن می‌سازد. هوروات معتقد است درک اینکه چرا ساعت‌هایی مانند این کار می‌کنند، می‌تواند به ما کمک کند تا به چیزی که او آن را «علت اصلی اصلی پیری» می‌نامد، سوق دهد.

ساعت‌های او بر اساس تجزیه و تحلیل برچسب‌های شیمیایی به نام گروه‌های متیل است که بر روی DNA مانند طلسم روی دستبند آویزان می‌شوند و به کنترل فعالیت ژن کمک می‌کنند. آنها محصولات اپی ژنتیک (به معنای واقعی کلمه، "بالاتر از ژنتیک")، حوزه ای هستند که اطلاعات ارثی را که در کد ژنتیکی نوشته نشده اند، مطالعه می کند. ده ها سال پیش، هوروات و همکارانش شروع به استفاده از دانش خود در ساخت ساعت کردند، ابتدا برای ارزیابی سن DNA از بزاق، و بعد برای تعیین سن خون، کبد و سایر بافت های فردی.

بسیاری از زیست شناسان در ابتدا بدبین بودند زیرا ساعت ها به جای درک مکانیسم های زیست مولکولی، ریشه در آمار داشتند. با این حال، دقت ساعت‌ها در برابر آزمایش‌ها ایستادگی کرد و موج‌هایی را در جامعه زیست‌پزشکی ایجاد کرد. دانشمندان شروع به استفاده از ساعت‌های هوروات در تحقیقات خود برای اندازه‌گیری پیری سلول‌ها کردند، زیرا این ساعت‌ها نسبت به سن تقویمی بهتر داوری وضعیت بدن و خطر ابتلا به بیماری بودند. ساعت‌های اپی ژنتیک بیش از سایر نشانگرهای زیستی به روند واقعی پیری نزدیک هستند. وادیم گلادیشف، بیوشیمیست در بیمارستان زنان بریگهام و دانشکده پزشکی هاروارد که سرطان و پیری را مطالعه می کند. اکنون ساعت ها برخی از دانشمندان را به بازنگری در ایده های خود در مورد چیستی پیری و همچنین ارتباط آن با بیماری ها سوق می دهد.

گفت: "من اکنون همکارانی دارم که در زمینه سرطان سینه کار می کنند و [در حال] فکر کردن به این موضوع هستند که اگر پیری بیولوژیکی پیشرفته ای دارید، آیا این برای سرطان سینه نیز آموزنده است؟" سارا هاگاپیدمیولوژیست مولکولی در موسسه کارولینسکا در استکهلم، سوئد. او افزود: اگر ساعت‌ها بتوانند به طور مفید نحوه جلوگیری از ایجاد اختلالات مرتبط با افزایش سن را نشان دهند، "ما می‌توانیم نه تنها از یک بیماری بلکه از بسیاری از بیماری‌ها پیشگیری کنیم."

دیدن یک سیگنال

در دهه‌های گذشته بارها و بارها، محققان بیولوژیکی فکر می‌کردند ساعتی برای پیری در دسترس است. به عنوان مثال، آنها در اوایل دهه 1960 آموختند که سلول‌هایی که در کشت رشد می‌کنند، جاودانه نیستند، بلکه تنها پس از 40 تا 60 دور تکرار می‌میرند، که نشان می‌دهد سلول‌ها نوعی ساعت پیری را در خود جای داده‌اند. در سال 1982، محققان فکر کردند که ممکن است مکانیسم ساعت را با جداسازی تلومرها، کمپلکس‌های پروتئین DNA در انتهای کروموزوم‌ها که هر بار تقسیم سلولی کوتاه می‌شوند، پیدا کرده باشند. وقتی تلومرها به شدت کوتاه می شوند، سلول ها می میرند.

اما تلومرها به عنوان یک ساعت پیر نمی شوند. همبستگی طول تلومر با سن و مرگ و میر در انسان ضعیف است و در برخی از گونه های دیگر وجود ندارد. تلومر [طول] در واقع سن را ردیابی نمی کند. این فقط تکثیر سلولی را ردیابی می کند کن راج، محقق اصلی در آزمایشگاه آلتوس.

به عنوان جایگزینی برای طول تلومر، در سال 2009 هوروات شروع به کار بر روی ساعتی کرد که بر اساس رونوشت‌های RNA ژن‌های فعال یک سلول، الگوهایی برای پروتئین‌هایی که یک سلول را تعریف می‌کنند و به آن اجازه عملکرد می‌دهند، کار کرد. برای دو سال بعد، او تلاش کرد تا این رویکرد را عملی کند، اما فایده‌ای نداشت: داده‌های رونویسی بسیار پر سر و صدا بودند.

اما در سال 2010، هوروات به درخواست کمک یکی از همکارانش در UCLA پاسخ داد. برای مطالعه ارتباط احتمالی بین گرایش جنسی و اپی ژنتیک، محقق بزاق دوقلوهای همسان را جمع آوری کرد که در گرایش جنسی متفاوت بودند، با این فرضیه که DNA در سلول های بزاق آنها ممکن است برخی از تفاوت های ثابت را در الگوهای متیلاسیون نشان دهد. برادر دوقلوی هوروات همجنسگرا است. هوروات دگرجنس گرا است. تف خود را عرضه کردند.

تجزیه و تحلیل این مطالعه مکان‌هایی را در DNA که در آن بازهای سیتوزینی قرار دارند بررسی کرد و بررسی کرد که کدام یک از آنها متیله شده‌اند. (سیتوزین ها تنها پایه هایی هستند که گروه های متیل به آنها متصل می شوند.) فناوری آزمایشگاه روی تراشه که اخیراً معرفی شده است، آزمایش ده ها هزار سایت سیتوزین را در DNA هر سلول آسان می کند. هنگامی که همکار برای تجزیه و تحلیل داده ها به یک آمارگیر نیاز داشت، هوروات خدمات خود را به طور داوطلبانه ارائه کرد.

او آنچه را که به دنبالش بودند، پیدا نکرد. هوروات گفت: "هیچ علامتی برای همجنسگرایی وجود نداشت." «اما چون داده‌ها روی رایانه من بود، گفتم اجازه دهید اثرات پیری را بررسی کنم، زیرا سن دوقلوها در این مطالعه دهه‌ها بود.

تا آن زمان، هوروات در تحقیقات خود از داده های اپی ژنتیکی خودداری کرده بود. رابطه الگوهای متیلاسیون با بیان ژن آشفته و غیرمستقیم است و بعید به نظر می رسید که ارتباط مفیدی با پیری نشان دهد. اما اکنون که او این داده های بادآورده اپی ژنتیک را در اختیار داشت، به نظر می رسید هیچ ضرری برای نگاه کردن نداشت.

هوروات شروع به تطبیق الگوهای متیلاسیون با سن دوقلوها کرد. در هر نمونه بزاق - یا هر نمونه از هر بافتی - همه سلول ها الگوی متیلاسیون یکسانی را نشان نمی دهند. اما نسبت سلول هایی که در یک سیتوزین معین در DNA متیله می شوند را می توان اندازه گیری کرد. به عنوان مثال، در یک نمونه، 40 درصد از سلول ها ممکن است در یک موقعیت خاص متیله شوند. در دیگری، این نسبت ممکن است 45٪ یا 60٪ باشد.

در کمال تعجب، هوروات یک همبستگی قوی بین سن و نسبت سلول ها با متیلاسیون پیدا کرد، حتی زمانی که او فقط به یک محل در DNA نگاه کرد. نگاه کردن به مکان‌های بیشتر دقت را افزایش داد.

او گفت: «این همه چیز را برای من تغییر داد. "یک بار به سیگنال پیری نگاه کردم، مرا غافلگیر کرد."

هوروات مدلی ساخت که سن افراد را پیش بینی کرد از وضعیت متیلاسیون حدود 300 سیتوزین در میلیون ها سلول در یک نمونه بزاق. او گفت: "شما در یک فنجان تف کنید، و ما می توانیم سن شما را اندازه گیری کنیم."

به زودی او در حال ساخت مدل های ساعت اپی ژنتیک برای ارزیابی سن بیولوژیکی خون، کبد، مغز و بافت های مختلف دیگر بود. ابتدا، او نسبت سلول‌ها را در هر نمونه که متیلاسیون را در مکان‌های خاص نشان می‌داد، اندازه‌گیری کرد. از این داده‌ها، او پروفایل‌هایی از بافت‌ها ایجاد کرد که نسبت سلول‌های متیله شده در هر محل را توصیف می‌کرد.

او برای ساخت یک ساعت، هزاران پروفایل اپی ژنتیکی را به همراه سن هر بافتی که نمایه شده بود به رایانه داد. کامپیوتر از طریق یادگیری ماشینی، سن را به الگوهای متیلاسیون مرتبط کرد. همچنین تعداد سایت های مورد نیاز برای پیش بینی سن را کاهش داد. سپس کامپیوتر اهمیت متیلاسیون هر سایت را در محاسبات خود وزن کرد تا بهترین فرمول پیش بینی سن را ایجاد کند، که هوروات آن را روی مجموعه جداگانه ای از نمونه های سنین شناخته شده آزمایش کرد.

در عرض دو سال، او ساعت‌های پیری بافت جداگانه آنها را در یک فرمول ترکیب کرد یک ساعت "پان بافت".، منتشر شده در سال 2013. ساعت پان بافت "تغییر بازی" بود، گفت دانیل بلسکی، یک اپیدمیولوژیست در دانشکده بهداشت عمومی میلمن کلمبیا. این فرمول برای تمام سلول های انسانی حاوی DNA اعمال می شود. و هر کسی می توانست از آن استفاده کند - هوروات نرم افزار را روی اینترنت قرار داد. با آپلود کردن داده‌های متیلاسیون خود، زیست‌شناسان می‌توانستند بفهمند که چه مقدار از زمان بر سلول‌های نمونه‌های آن‌ها وارد شده است.

کمی سازی کاهش

ساعت پان بافت هوروات به طور معجزه آسایی در پیش بینی سن تقویمی دقیق بود. همچنین به نظر می رسید که منعکس کننده تفاوت های اساسی بین سن تقویمی و بیولوژیکی باشد. محققان کشف کردند که وقتی ساعت اپی ژنتیک سن فرد را بیشتر از سن تقویمی تخمین زد، خطر ابتلا به بیماری و مرگ در فرد بیشتر بود. وقتی ساعت تخمین زد که فردی جوانتر است، خطر او پایین آمد. حتی اگر ساعت اپی ژنتیک از داده های سن تقویمی مشتق شده بود، الگوریتم آن مرگ و میر را بهتر از سن پیش بینی می کرد.

بنابراین در اواخر سال 2014، هوروث به طور واضح سن بیولوژیکی را ردیابی کرد. او و همکارانش از جمله مورگان لوین (یک محقق آسیب شناسی در دانشگاه ییل که اخیراً به آزمایشگاه آلتوس پیوسته است) و لوئیجی فروچی از موسسه ملی پیری، الگوریتمی را بر روی یک معیار ترکیبی آموزش داد که شامل سن تقویمی و همچنین نتایج 9,900 آزمایش شیمیایی خون بود که بیماری و مرگ و میر را پیش‌بینی می‌کرد. این داده ها از خون بیش از XNUMX بزرگسال در نظرسنجی ملی سلامت و تغذیه بدست آمد. ساعت حاصل، DNAm PhenoAgeکه در سال 2018 منتشر شد، مرگ و میر کلی و خطر ابتلا به بیماری های قلبی عروقی، بیماری های ریوی، سرطان و دیابت و سایر پیامدها را پیش بینی کرد. یک سال بعد، هوروات و تیمی به رهبری آکی تی لو از UCLA پیش بینی دقیق تری از زمان تا مرگ منتشر کردند. عصر تلخ، که به جنسیت، سن تقویمی، سابقه سیگار کشیدن و نشانگرهای مرگ و میر پروتئین خون یک فرد نگاه کرد.

ابزار جدیدی از بلسکی و همکارانش که در سال 2020 معرفی شد و در اوایل سال جاری به روز شد، به عنوان سرعت سنج پیری عمل می کند. در ایجاد آنها سرعت پیری نشانگر زیستی، آنها میزان تغییر در 19 نشانگر عملکرد اندام را در چهار سن اندازه‌گیری کردند، آنها را در یک شاخص جمع‌آوری کردند و آن را با متیلاسیون مدل‌سازی کردند. بلسکی گفت: «ما در واقع در حال کمی کردن روند جاری کاهش سن و یکپارچگی سیستم هستیم. او گفت، کسانی که با این معیار سریع‌تر پیر می‌شوند، جوان‌تر می‌میرند، و افزود که این معیار مرگ و میر را به اندازه گریم ایج پیش‌بینی می‌کند و ممکن است سکته مغزی و زوال عقل را حتی بهتر پیش‌بینی کند.

سوال قدیمی

در سال 2017، نمایندگان بنیاد خانواده پل جی آلن پس از یکی از صحبت های هوروات به سراغ او رفتند. آنها کار او را دوست داشتند و به او پیشنهاد کردند که رویای بزرگ داشته باشد، زیرا این بنیاد از تلاش های پرخطر حمایت می کند. آنها گفتند که پروژه ای را پیدا کنید که هیچ کس دیگری آن را تامین نکند.

طولی نکشید که هوروات یک ساعت پیری را پیشنهاد کرد که برای همه مهره داران کاربرد دارد. این پیشنهاد به تصویب رسید - به اندازه کافی عجیب و غریب بود - اما وقتی هوروات متوجه بزرگی آن چیزی شد، این طرح به یک ساعت نسبتاً محدود برای همه پستانداران تبدیل شد.

تا ژانویه 2021، هوروات اطلاعات متیلاسیون 128 گونه پستاندار را داشت. ساعتش را پست کرد در سرور پیش چاپ biorxiv.org. همان فرمول ریاضی، همان سیتوزین ها برای موش یا موش یا سگ یا خوک. هوروات گفت: ما می توانیم پیری را در همه این گونه ها اندازه گیری کنیم. با این حال، او جهان را برای اطلاعات بیشتر جستجو کرد.

در اواخر تابستان سال گذشته، هوروات با دارن پیترسن، متخصص پانگولین در بنیاد تیکی هیوود در هراره، زیمبابوه، به او منابعی برای جمع آوری داده ها از پانگولین ها و چندین گونه دیگر ارائه می دهد. هیچ کس حتی نمی دانست چقدر پانگولین ها عمر می کنند. برخی از حساب‌های رسمی می‌گویند 15 تا 20 سال است، اما پیترسن فکر می‌کرد که حداقل برخی از انواع آن‌ها بیشتر عمر می‌کنند. او نوشت: «یک حیوانی که اخیراً پیر شدیم حدود 34 سال سن داشت (اگرچه با خطای نسبتاً زیادی).

هوروات از داده های بافتی ارائه شده، یک ساعت پانگولین ساخت، یک تایمر طول عمر بیشتر برای افزودن به مجموعه خود. شما یک ساعت خوکی می خواهید، من یک ساعت خوکی دارم. هوروات گفت: من یک ساعت برای کانگوروها و فیل ها دارم. هر ساعت مخصوص گونه‌ها برای دانشمندان این رشته یک موهبت بود. برای مثال، محققان فیل، ساعت فیل را می‌خواستند تا بتوانند ساختار سنی جمعیت‌های وحشی را برای کمک به تلاش‌های حفاظتی مشخص کنند.

اما ساعتی که همه آنها را با هم ادغام می کند می تواند به یک سوال اساسی تر پاسخ دهد: پیری چیست؟ یک دیدگاه این است که بدن شما مانند کفش‌هایتان پیر می‌شود و به تدریج از بین می‌رود و در اثر پوشیدن از بین می‌رود. اما پیش‌بینی‌های موفقیت‌آمیز ساعت پان پستانداران نشان می‌دهد که چیزی باعث می‌شود سلول‌ها در یک جدول زمانی خاص از کار بیفتند، شاید به دلیل ژن‌های تکوینی که پس از اتمام کارشان خاموش نمی‌شوند. راج، یکی از بیش از 100 سازنده ساعت، گفت: «این نشان دهنده عنصر جبرگرایی در پیری است.

داده‌های ساعت‌های متیلاسیون نشان می‌دهد که پیری خیلی زود، مدت‌ها قبل از تجزیه بدن شروع می‌شود. در یک مقاله 2021گلادیشف و همکارانش یک ساعت متیلاسیون را توصیف می کنند که مراحل رشد پستانداران را مشخص می کند. آنها دریافتند که در طی مراحل اولیه جنین زایی در موش، جوانسازی نوعی سن جنین را به صفر می رساند. پیری بیولوژیکی به سرعت پیش می‌رود، حتی اگر کودکان انسان در این مدت قوی‌تر شوند، نه ضعیف‌تر، و مرگ‌ومیر در انسان‌ها تا حدود 9 سالگی کاهش می یابد. راج گفت: «این برای من بسیار عمیق است، زیرا این مسئله پیری را به فرآیندی تبدیل می کند که از روند توسعه جدایی ناپذیر است.

دو مطالعه اخیر روی موش خال برهنه، جونده ای با طول عمر غیر محتمل 37 ساله، نشان می دهد که این حیوان از نظر اپی ژنتیکی پیر می شود، حتی اگر احتمال مرگ آن با سن تقویمی افزایش نمی یابد. گلادیشف که رهبری می کرد، گفت: «من فکر می کنم میزان مرگ و میر بهترین معیار برای سنجش پیری نیست یکی از مطالعات. "پیری نتیجه اجتناب ناپذیر زنده بودن است."

البته کهولت سن هنوز هم اثرات تجربه، رفتار و محیط را منعکس می کند. برای مثال، سیگار کشیدن و قرار گرفتن در معرض نور خورشید می تواند آن را تسریع کند، همانطور که با متیلاسیون و سایر نشانگرها اندازه گیری می شود، و ورزش یا یک رژیم غذایی کم کالری می تواند آن را متوقف کند. در کار منتشر شده در مارس گذشته، یک ساعت اپی ژنتیک متناسب با مارموت ها نشان داد که خواب زمستانی پیری را کند می کند و یک کاغذ هفته گذشته منتشر شد نشان داد که همین امر در مورد خفاش ها نیز صادق است. ساعت ساخته شده برای ماکاک های رزوس نشان می دهد که در سال 2017 طوفان ماریا در یک کلونی از میمون ها در جزیره ای در سواحل پورتوریکو سرعت پیری را افزایش داد.

نخستین گناه ادم ابوالبشر

هیچ کس به طور کامل نمی داند که چرا ساعت ها کار می کنند. برخی اما نه همه ژن‌ها و مسیرهای مولکولی درگیر شناسایی شده‌اند و محققان هنوز در حال یادگیری هستند که چگونه الگوهای متیلاسیون بر رفتارها و سلامت سلول‌ها، بافت‌ها و اندام‌ها تأثیر می‌گذارند. هوروات گفت: «این به چیزی برمی گردد که من «گناه اصلی ساخت و ساز» می نامم. "این مبتنی بر یک مدل رگرسیون [آماری] است که تا حدی با زیست شناسی ناشناس است."

برای جبران این گناه، راج و هوروات شروع به جستجوی همبستگی های بیولوژیکی برای پیری اپی ژنتیک کرده اند. آنها اخیراً کشف کرده اند که مطابق با تأثیر رژیم های غذایی با کالری بر پیری، اختلالات مسیرهای بیوشیمیایی که بدن برای احساس نیاز خود به مواد مغذی استفاده می کند، پیری را کند می کند. از مسیر خارج کردن کار میتوکندری آن را تسریع می کند. این ساعت همچنین بلوغ سلول های بنیادی را دنبال می کند. نویسندگان در سال 2022 نوشتند اگر این فرآیندها در سطح عمیق تری به هم متصل شوند، ساعت های اپی ژنتیک ممکن است مکانیسم های متحد کننده پیری را نشان دهند. کاغذ در پیری طبیعت.

با این حال، این مکانیسم های متحد کننده چه می توانند باشند یا اینکه چرا وضعیت متیلاسیون پیری را به خوبی دنبال می کند، هنوز به طور کامل مشخص نشده است. هاگ می‌گوید: «ما واقعاً نمی‌دانیم که آیا ساعت‌های اپی ژنتیک به طور علّی با پیری مرتبط هستند یا خیر.

حتی اگر اینطور باشد، ساعت های اپی ژنتیک تقریباً به طور قطع تنها بخشی از آنچه در طول پیری رخ می دهد اندازه گیری می کنند. مت کبرلین، محققی در دانشکده پزشکی دانشگاه واشنگتن در سیاتل که زیست شناسی پیری را مطالعه می کند. او گفت: «اینکه آیا آنها واقعاً بیش از یک بعد منفرد از سن بیولوژیکی را اندازه‌گیری می‌کنند، مشخص نیست. این بخشی از مشکل اینجاست - اختلاط سن اپی ژنتیکی با سن بیولوژیکی. از نظر من اینها معادل نیستند.»

راج بر این باور است که تغییرات متیلاسیون منعکس کننده از دست دادن هویت سلولی با افزایش سن است. همه سلول‌های بدن دارای DNA یکسانی هستند، بنابراین آنچه که یک سلول کبد را به سلول کبدی و یک سلول قلب را به سلول قلب تبدیل می‌کند، الگوی بیان ژن است که اپی ژنتیک آن را کنترل می‌کند. راج پیشنهاد می‌کند که با افزایش سن تغییرات در متیلاسیون، برخی از این کنترل‌ها ممکن است از بین بروند و با برنامه‌های رشدی دوباره ظهور کنند که باید خاموش شوند.

اگرچه ساعت های متیلاسیون ممکن است در حال حاضر دقیق ترین مانیتور سن بیولوژیکی باشند، برخی مطالعات نشان می دهد امکان پیشرفت وجود دارد. یک پیش‌بینی‌کننده دقیق‌تر ممکن است ویژگی‌های سلولی قابل اندازه‌گیری - مثلاً سطوح بیان پروتئین، متابولیت یا ژن - را با سیگنال‌های فیزیولوژیکی و شاخص شکنندگی ترکیب کند. هاگ گفت: «ما اکنون می‌توانیم چیزهای زیادی را در یک انسان اندازه‌گیری کنیم. "هر چه تعداد این موارد بیشتر باشد، پیری خود را با دقت بیشتری ثبت خواهید کرد."

هاگ هشدار داد که ساعت های متیلاسیون نیز کاربردهای بالینی محدودی دارند. افراد می توانند سن بیولوژیکی خود را از منابع تجاری مختلف خریداری کنند، اما نه تنها نتایج اغلب متناقض هستند، بلکه فاقد ارتباط بالینی هستند زیرا ساعت ها برای تجزیه و تحلیل در سطح گروه در تحقیقات در نظر گرفته شده بودند. او گفت: "آنها برای پیش بینی در سطح فردی ساخته نشده اند."

و حتی اگر فردی سبک زندگی خود را به گونه ای تغییر دهد که سن بیولوژیکی خود را طبق این ساعت ها کاهش دهد، آیا عمر طولانی تری خواهد داشت یا خطر ابتلا به بیماری کمتری خواهد داشت؟ کابرلین گفت: «ما هنوز این را نمی دانیم.

هوروات اکنون در حال آماده کردن مقاله ای درباره ساعت پان پستانداران خود برای ارسال به یک مجله است. اگرچه او به ظاهر به هدف خود رسیده است، اما شکاف های موجود در مجموعه او هنوز او را آزار می دهد. در ماه مه، او با متصدیان ارشد موزه ای در استرالیا درباره به دست آوردن بافت از خال های کیسه دار، موجودی کوچک و عمدتاً نابینا که بیشتر وقت خود را در زیر زمین می گذراند، مکاتبه کرد. او گفت: «ما قبلاً داده‌هایی از 348 گونه پستانداران تولید کرده‌ایم، اما می‌خواهیم موارد بیشتری را اضافه کنیم.

وقتی هوروات این پروژه را پیشنهاد کرد، تصمیم گرفت 30 گونه را تجزیه و تحلیل کند، اما 30 گونه به زودی به 50، سپس 100 و سپس بیش از سه برابر آن تبدیل شدند. او گفت: «من باید با خودم قدم بگذارم، زیرا این انگیزه را دارم که بیشتر جمع کنم.»