Dans nos horloges cellulaires, elle a trouvé toute une vie de découvertes | Magazine Quanta

Ce matin, lorsque le soleil s'est levé, des milliards d'humains ont ouvert les yeux et ont admis dans leur corps un rayon de lumière venue de l'espace. Lorsque le flux de photons frappait la rétine, les neurones se déclenchaient. Et dans chaque organe, dans presque chaque cellule, une machinerie élaborée était en mouvement. L'horloge circadienne de chaque cellule, un complexe de protéines dont les niveaux augmentent et diminuent avec le soleil, s'est mise en marche.

Cette horloge synchronise notre corps sur le cycle lumière-obscurité de la planète en contrôlant l’expression de plus de 40 % de notre génome. Les gènes responsables des signaux immunitaires, des messagers cérébraux et des enzymes hépatiques, pour n'en nommer que quelques-uns, sont tous transcrits pour fabriquer des protéines lorsque l'horloge indique qu'il est temps.

Cela signifie que vous n'êtes pas, biochimiquement, la même personne à 10 heures qu'à 10 heures. Cela signifie que le soir est un moment plus dangereux pour prendre de fortes doses d'acétaminophène, un analgésique : les enzymes hépatiques qui protègent contre le surdosage se raréfient alors. Cela signifie que les vaccins administrés le matin et le soir travailler différemment, et que les travailleurs de nuit, qui désobéissent de manière chronique à leurs horloges, présentent des taux plus élevés de maladies cardiaques et de diabète. Les personnes dont les horloges tournent vite ou lentement sont piégées dans un état hideux de décalage horaire perpétuel.

«Nous sommes liés à cette journée d'une manière que je pense que les gens repoussent simplement», me dit la biochimiste Carrie Partch. Si nous comprenons mieux l’horloge, a-t-elle soutenu, nous pourrons peut-être la réinitialiser. Grâce à ces informations, nous pourrions façonner le traitement de maladies, du diabète au cancer.

Depuis plus d’un quart de siècle, Partch vit parmi les orchestrateurs de l’horloge circadienne, les protéines dont la montée et la chute contrôlent son fonctionnement. En postdoc, elle a produit la première visualisation de la paire de protéines liée en son cœur, CLOCK et BMAL1. Depuis lors, elle a continué à rendre visibles les spirales et les torsions de ces protéines de l'horloge, ainsi que d'autres protéines de l'horloge, tout en montrant comment les changements dans leur structure ajoutent ou soustraient du temps à la journée. Ses réalisations dans la poursuite de ces connaissances lui ont valu certains des plus grands honneurs dans ce domaine scientifique : le Prix ​​Margaret Oakley-Dayhoff de la Biophysical Society en 2018, et le Prix ​​de l'Académie nationale des sciences en biologie moléculaire en 2022.

Pendant que Partch parle, son sentiment de l'acharnement du temps – du fait qu'il nous change, que nous le voulions ou non – nuance sa voix d'une urgence tranquille. Son propre voyage a pris une tournure inattendue ; au sommet de sa carrière, elle doit s'éloigner du laboratoire. En 2020, à l'âge de 47 ans, on lui diagnostique une sclérose latérale amyotrophique, également connue sous le nom de maladie de Lou Gehrig. En moyenne, les gens vivent trois à cinq ans après avoir reçu un diagnostic de SLA.

Mais cela ne l’a pas empêché de réfléchir aux protéines de l’horloge.

Elle les considère, la tête penchée, la lumière scintillant sur ses lunettes, alors que nous sommes assis dans son salon dans les collines près de Santa Cruz, en Californie. Il est midi, environ six heures depuis que les photons du soleil ont propulsé CLOCK et BMAL1 en action dans ses cellules et dans celles de tous les humains de la côte ouest.

Dans son esprit, elle peut voir les protéines, chacune étant un ruban d'acides aminés replié sur lui-même. BMAL1 a une sorte de taille que CLOCK serre comme un danseur. Chaque aube, le couple se perche sur la masse densément enroulée du génome et invoque les enzymes qui transcrivent l’ADN. Au cours de la journée, ils font sortir d’autres protéines de la machinerie cellulaire, dont plusieurs qui finissent par éclipser leur pouvoir. Trois protéines trouvent prise sur CLOCK et BMAL1 vers 10 heures, les faisant taire et les supprimant du génome. Le courant de la transcription de l’ADN change. Enfin, au plus profond de la nuit, une quatrième protéine saisit une étiquette à l’extrémité de BMAL1 et empêche toute activation ultérieure.

Les secondes se transforment en minutes, les minutes en heures. Le temps passe. Peu à peu, le quatuor répressif de protéines se désintègre. Aux petites heures du matin, CLOCK et BMAL1 sont à nouveau amenés à renouveler le cycle.

Chaque jour de votre vie, ce système relie la biologie fondamentale du corps au mouvement de la planète. Chaque jour de votre vie, aussi longtemps qu'il dure. Personne ne comprend cela plus profondément que Partch.

Chimie et horloges

L'été précédant la cinquième année, alors que Partch avait 10 ans, son père, qui était menuisier, s'est cassé le poignet en jouant au football. En attendant que son état guérisse, il a suivi des cours de chimie au collège communautaire local. Il lui a montré comment équilibrer une équation chimique dans leur cour à l’extérieur de Seattle, sur un tableau appuyé contre un arbre. C'était son introduction à la chimie.

« Je me souviens encore d’avoir pensé à quel point la précision mathématique de la chimie était si intéressante – très différente de la biologie qu’on nous enseignait à l’école à cet âge », a-t-elle déclaré.

Lorsqu'elle se souvient de ses années universitaires à l'Université de Washington, elle admet avec un petit rire ironique que certains de ses souvenirs d'assister à des concerts - se rendre à Olympia pour des spectacles de Sleater-Kinney, voir Mudhoney et Nirvana - et son plaisir de des livres d'auteurs comme Ursula Le Guin. Mais elle a également été fascinée par un cours sur la chimie des systèmes vivants. Après avoir obtenu son diplôme, elle est allée travailler comme technicienne à l’Université de la santé et des sciences de l’Oregon à Portland. Chaque jour, elle tombait de plus en plus amoureuse de la recherche. En 2000, elle et son petit ami, James, musicien et graphiste, ont déménagé à l'Université de Caroline du Nord à Chapel Hill afin qu'elle puisse commencer son doctorat.

Peu de temps après son arrivée, elle a rencontré la personne qui allait lui présenter l’horloge. Elle a suivi un cours avec le biologiste moléculaire Aziz Sancar, connu pour ses travaux sur la réparation de l'ADN. « J’ai été frappée par la belle précision avec laquelle il nous a enseigné les concepts scientifiques de base », a-t-elle déclaré. « Je me disais : « Mec, ce type est tellement intelligent. » » Sancar, qui gagner un prix Nobel en 2015, étudiait une classe de protéines appelées cryptochromes, qui comprend les protéines horloges CRY1 et CRY2. Chaque organisme, des cyanobactéries aux séquoias, possède une horloge, mais les protéines qui pilotent chaque système sont différentes. Chez les mammifères, les protéines les plus importantes, outre CLOCK et BMAL1, sont les formes de PER et CRY.

En tant qu'étudiant diplômé du laboratoire de Sancar, Partch a découvert que CRY1 avait une queue mystérieuse et non structurée. Personne ne savait ce que faisait cette section de la protéine, mais là encore, personne ne savait vraiment comment les bobines et les rubans des protéines d’horloge produisaient leurs effets remarquables. Et à la surprise de Partch, personne ne semblait s'en soucier beaucoup non plus. Joseph Takahashi et ses collègues de l'Université Northwestern avaient identifié les gènes de CLOCK et BMAL1 avec un grand succès quelques années auparavant ; l’hypothèse tacite parmi de nombreux scientifiques était que le gros du travail était fait.

Cela n'est même pas resté inexprimé. Lors d'une conférence en 2002, Partch a partagé avec quelques collègues qu'elle souhaitait comprendre la structure des protéines. "Pourquoi?" fut leur réponse : Nous savons déjà tout. Partch, poliment mais catégoriquement, n'était pas d'accord.

Après avoir obtenu son diplôme, elle est allée travailler au Southwestern Medical Center de l'Université du Texas en tant que postdoctorante dans le laboratoire de Kevin Gardner, biochimiste et biologiste structural maintenant au Advanced Science Research Center du City University of New York Graduate Center. Là, elle espérait pouvoir voir les protéines de l'horloge plus clairement en apprenant à utiliser deux techniques délicates mais puissantes.

Un poète des ombres

« La protéine circulaire touche la protéine carrée, c'est la magie » : c'est ainsi que Gardner résume le flou sur la structure moléculaire que, d'après son expérience, de nombreux biologistes se contentent d'accepter, car personne ne peut se concentrer sur tous les aspects de chaque système. Mais il a reconnu en Partch une âme sœur, quelqu'un déterminé à démonter les protéines et à les comprendre, et doté d'une mémoire presque encyclopédique pour la littérature sur l'horloge circadienne.

En travaillant avec lui, Partch a appris la cristallographie des protéines : comment mélanger des solutions à partir desquelles une protéine purifiée cristalliserait ; comment faire passer des rayons X à travers ce réseau cristallin ; comment déduire la forme de la protéine à partir des nuances subtiles du diagramme de diffraction. Un cristallographe est comme un poète des ombres : Rosalind Franklin, dont les images ont permis à Watson et Crick de déduire la structure de l'ADN, était une cristallographe. Pour Partch, les images grises brumeuses de la cristallographie promettaient un aperçu des structures qu'elle envisageait de suivre toute sa vie.

Mais la cristallographie a des limites. Il ne peut révéler que les formes de protéines suffisamment stables pour se cristalliser et ne fournit qu’un instantané de ces structures gelées. Partch savait que les formes statiques représentant les protéines dans les diagrammes des manuels obscurcissaient la vérité. Une protéine peut se mettre en portefeuille, se tordre comme un cliquet ou se dérouler et se replier dans une nouvelle forme étrange. Certaines protéines sont également très désordonnées, avec de longs brins spaghetti d'acides aminés reliant leurs régions les plus ordonnées.

C'est pourquoi la spectroscopie de résonance magnétique nucléaire, ou RMN, figurait également dans le plan de Partch. En RMN, des solutions de protéines hautement purifiées sont placées dans un aimant et frappées par des ondes radio. Les perturbations magnétiques qui en résultent de leurs noyaux atomiques, compilées et affichées par un logiciel, peuvent révéler à un œil averti la disposition des atomes d’une protéine. Si les conditions de mesure sont adaptées, vous pouvez déduire comment une protéine se déplace lorsqu'elle se lie à un partenaire, comment elle subit un changement de température ou comment elle passe d'un état à un autre. Lorsque Partch regarde un arc-en-ciel de données RMN sur un tracé XY, elle voit les mouvements rapides des groupes de liaison aux métaux et le lent repliement d'une protéine.

Lorsque son service du centre médical UT Southwestern a recruté Takahashi, le généticien qui avait identifié les gènes CLOCK et BMAL1, « vous feriez mieux de croire que je me suis insinué », a-t-elle déclaré joyeusement. Au moment où elle a quitté l'université, elle, Takahashi et leurs collègues avaient produit une image du complexe CLOCK-BMAL1 par cristallographie.

En 2011, lorsque Partch a déménagé avec James et leur jeune fils pour fonder son laboratoire à l’Université de Californie à Santa Cruz, elle repartait de zéro. Elle n’avait aucun projet de son postdoctorat à poursuivre. Elle n'avait que la singularité de sa vision pour comprendre l'horloge et, enfin, les outils pour la réaliser.

Le mécanisme des protéines

À l'extérieur de la fenêtre du bureau de Partch à l'UCSC, des rayons de lumière filtrent à travers les frondes de séquoia. Le bâtiment des sciences physiques est niché dans une forêt, où les moisissures visqueuses fleurissent et où les arbres inclinent leurs feuilles en obéissance à leur propre horloge circadienne. À l'intérieur des étudiants et des randonneurs qui sillonnent le sol moussu de la forêt, CLOCK, BMAL1 et leurs molécules compagnes sont occupées à produire le cocktail de protéines de l'après-midi du corps. C’est ici que Partch a eu l’occasion d’examiner plus en profondeur la biomécanique du temps.

Dès le début, elle se dirigeait vers un territoire inconnu. "Carrie est extrêmement unique", a déclaré Brian Zoltowski de la Southern Methodist University, qui était postdoctorale dans le laboratoire de Gardner avec elle. Il peut compter d’une part sur les laboratoires qui se concentrent sur les détails de la biologie structurale de l’horloge des mammifères. Les compétences requises sont ésotériques et le risque de consacrer des années d’efforts pour peu de progrès est grand.

Néanmoins, Partch s'avança dans l'inconnu et commença à renvoyer des dépêches. Avec son élève Chelsea Gustavson ainsi que le Haiyan Xu de l'Université de Memphis, elle a découvert que CRY1 faisait taire BMAL1 en se liant de manière compétitive à son queue frétillante et désordonnée; si la queue est mutée, l'horloge dévie du tempo ou même se désintègre complètement. Avec son élève Alicia Michel, elle a découvert que CLOCK se niche contre CRY1 en enfilant une boucle dans une poche dessus; si une mutation détruit la poche, les deux ne se lieront pas. Une mutation de PER2 le rend moins bien adapté à ses partenaires de liaison et le rend vulnérable à la dégradation; ce défaut avance l’horloge d’une heure et demie. L'orientation d'une simple liaison dans la queue de BMAL1 peut raccourcir la journée. Les pièces du mécanisme d’horlogerie commençaient à sortir de l’obscurité.

Elle s'est fait un nom en tant que collectionneuse de tous les changements qui peuvent accélérer l'horloge, la ralentir ou la faire taire complètement. "Carrie essaie d'approfondir la compréhension des mouvements individuels des protéines", a déclaré Zoltowski. Plus Partch passait de temps avec les protéines de l'horloge de morphing, mieux elle pouvait les voir dans son esprit et comprendre comment elles pourraient réagir à un médicament ou à une mutation.

Ses découvertes ont donné à la chronobiologie une nouvelle vision du fonctionnement des protéines d’horloge. "Ce que Carrie a découvert à maintes reprises, c'est qu'une grande partie de la biologie importante provient des parties des protéines qui sont non structurées, très flexibles et dynamiques", a déclaré Andy LiWang de l'Université de Californie, Merced, un biologiste structural qui étudie l'horloge chez les cyanobactéries. "Ce qu'elle fait avec la RMN est héroïque."

En 2018, Partch avait remporté des prix et rassemblé un formidable portefeuille de subventions. Elle a siégé aux conseils d'administration de sociétés savantes. Elle avait eu un deuxième fils et avait recruté un groupe d'étudiants et de postdoctorants inspirés par sa vision. Priya Crosby, une récente postdoctorante dans son laboratoire, se souvient avoir rencontré Partch lors d'une fête et s'être sentie impressionnée. La passion de Partch pour la compréhension de l'horloge était palpable, et elle semblait avoir toutes les données à ce sujet à portée de main.

C’est à ce moment-là que ses mains ont commencé à se gripper.

Une clé à molette

Au début, c'était de petites choses. "Mes mains gelaient pendant une seconde", a-t-elle déclaré. "Tu sais que ce n'est pas bien." Les médecins ont suggéré que c'était le stress. Ce n’est qu’en juin 2020, lorsqu’elle est retournée dans son laboratoire après des mois de confinement dû à la pandémie de Covid-19 et a constaté que les escaliers l’épuisaient, qu’elle a demandé une meilleure réponse. Près de six mois plus tard, elle a reçu un diagnostic : SLA, ou sclérose latérale amyotrophique.

La SLA tue les motoneurones et détruit la capacité de contrôler les mouvements. La motricité fine vient en premier, suivie par la capacité de marcher et de parler. Finalement, les neurones contrôlant la respiration disparaissent. Après un diagnostic, les gens ont tendance à ne vivre que quelques années.

Partch adorait travailler sur la paillasse du laboratoire. Parmi ses étudiants, elle était connue pour mener elle-même des expériences préliminaires pour voir si une idée avait du potentiel. Elle était familière dans le laboratoire, s'activant avec des seaux à glace parsemés de tubes de protéines.

«Ma dernière préparation protéinée remonte à janvier, il y a environ deux ans», se souvient-elle. "Que papier dans Nature — nous avions la structure initiale. On essayait de faire des mutations pour voir si ça tenait la route. … J'ai traversé la moitié des mutants et je me suis dit : « Oh mon Dieu. » » Le seau à glace ressemblait à du plomb dans ses bras.

Partch utilise désormais un fauteuil roulant motorisé. Des boutons ont été installés dans le bâtiment du laboratoire pour qu'elle puisse ouvrir les portes, et James la conduit au travail. Elle travaille toujours à temps plein : elle rencontre des étudiants, envoie des courriels, imagine de nouvelles expériences. Parler est devenu plus difficile, mais son esprit n’est pas affecté. Parfois, les inconnues semblent surgir et le chagrin menace de la submerger, mais elle laisse ces moments passer. «J'essaie de vivre», dit-elle.

Il y en a encore aujourd'hui. Et aujourd’hui, et aujourd’hui, aussi longtemps que le cycle peut se répéter.

Vérités universelles du temps

C'est un matin brumeux de mai, environ quatre heures après le début de la danse de CLOCK et BMAL1. Dans le bureau de Partch, elle et Diksha Sharma, un étudiant diplômé du laboratoire, discute de sa passion pour les segments protéiques repliés appelés domaines PAS. «Nous sommes comme deux pois dans une cosse», déclare Partch. Sharma teste si les domaines PAS dans CLOCK et BMAL1 peuvent être ciblés par une bibliothèque de médicaments pour contrôler l'horloge. "Nous pensons que c'est faisable", déclare Partch.

Dans l’espace laboratoire, un groupe d’étudiants et de postdoctorants sont à l’œuvre. Raphaël Robles salue et sourit depuis un banc où il prépare des tubes pour une préparation protéique. Il y a moins d’étudiants de premier cycle qu’avant, peut-être parce que Partch n’enseigne plus. Son étudiant diplômé Megan Torgrimson, qui a suivi le cours de Partch à l'université, se souvient de son magnétisme en tant que conférencière. Mais même si Partch aimait avoir des mentorés plus jeunes, elle estime que plus d'espace pour que tout le monde puisse travailler n'est pas une mauvaise chose. «Je suis tellement excitée par chaque projet en cours dans le laboratoire en ce moment», dit-elle.

Au cours des trois dernières années, de nombreux projets de longue date ont vu le jour. Sur un écran du labo, le postdoc Jon Philpott extrait un chiffre du groupe nouveau papier in Cellule moléculaire, concernant une mutation de PER2 associée au trouble familial de la phase du sommeil, une condition qui raccourcit le cycle quotidien de quatre heures. Il montre sur la figure comment PER2 est une masse de régions pour la plupart désordonnées. « Ce sont des régions extrêmement importantes », dit-il. Jusqu’à ce que Partch démontre le contraire, « la plupart des gens pensaient que le désordre était constitué d’éléments non fonctionnels ».

Lors d'une réunion de laboratoire, les jeunes scientifiques mènent la discussion sur les nouvelles données. Partch est assise dans son fauteuil roulant et écoute, intervenant de temps en temps. « Le laboratoire a été formidable pour gérer l'incertitude » du diagnostic, me dit-elle. Maintenant qu’elle ne peut plus faire d’expériences elle-même, elle concentre une grande partie de son énergie à les orienter dans la bonne direction.

Partch réfléchit de plus en plus aujourd'hui à ce qui est universel dans la mesure du temps dans la vie. Il y a quelques années, LiWang l'a invitée à travailler avec lui sur l'horloge des cyanobactéries, qui n'a aucun élément en commun avec l'horloge humaine. Il se compose de seulement trois protéines appelées KaiA, KaiB et KaiC, dont l'activité augmente et diminue au rythme de 24 heures, et de leurs deux partenaires de liaison, qui pilotent la traduction des gènes. En 2017, l'équipe dirigée par LiWang et Partch structures détaillées publiées de chacun des complexes, révélant les plis et les torsions qui permettent de les attacher les uns aux autres. Plus tard, le groupe a montré qu’il pouvait mettre les protéines de l’horloge dans un tube à essai et les faire fonctionner pendant des jours, voire des mois.

Ils étaient profondément occupés à enregistrer le fonctionnement de ce cycle lorsque Partch a reconnu quelque chose qu'elle avait vu en étudiant l'horloge humaine : la compétition. La petite balise où CRY1 se lie à BMAL1 est également celle où se lie l'un des activateurs les plus puissants de BMAL1. Si CRY1 surpasse cet activateur et prend sa place sur l'étiquette, l'horloge ne peut qu'avancer. Il est enfermé dans ce processus, attendant les minutes et les heures jusqu'à ce que la liaison de la protéine CRY1 se désintègre et que le cycle de l'horloge recommence.

Dans l'horloge cyanobactérienne, a réalisé Partch, la compétition entre les composants fonctionne de la même manière. Il apparaît également dans l’horloge d’organismes comme les vers et les champignons. "Cela semble être un principe conservé dans des horloges très, très différentes", a-t-elle déclaré. Elle se demande si cela reflète une vérité biophysique fondamentale sur la façon dont la nature fabrique des machines qui avancent dans le temps, en suivant un chemin dont elles ne peuvent pas s'écarter.

Le moment de la vie sur Mars

Une aube de plus. La lumière du soleil rayonne à travers les confins froids de l’espace, jusqu’à la Terre, dans les yeux bleu porcelaine de Carrie Partch. CLOCK et BMAL1 commencent leur danse. Elle va au travail. Elle passe du temps avec ses garçons, âgés de 13 et 18 ans. La plus jeune, qui aime parcourir les terriers de YouTube sur la chimie, insiste pour qu'ils regardent ensemble une vidéo merveilleusement loufoque d'une heure sur l'isolation de la vanilline des gants en caoutchouc et sa transformation en sauce piquante. Elle pense aux rubans et aux bobines de protéines d’horloge. Certaines personnes confrontées à son diagnostic pourraient décider qu'il est temps de faire quelque chose de différent, mais Partch n'a jamais envisagé de se détourner du temps. Elle veut connaître la fin de trop d'histoires.

Lorsqu'elle imagine un avenir dans lequel nous comprendrons réellement la biologie circadienne, elle imagine savoir ce que fait l'horloge d'une personne à tout moment de la journée. En réponse à un appel à propositions lancé par la Defense Advanced Research Projects Agency (DARPA), elle et ses collègues ont eu l'idée d'une sonde nasale capable d'évaluer l'état de votre horloge, de transmettre des données à son sujet et peut-être même de la modifier. La DARPA est connue pour favoriser les propositions farfelues, mais Partch plaisante en disant qu'elle a surpassé la DARPA, puisqu'elle n'a pas obtenu l'argent. Elle pense encore au potentiel de cet appareil.

De toutes les planètes tourbillonnantes du système solaire, c'est celle-ci, avec ses journées de 24 heures, qui nous a façonnés. Pour cette raison, des questions importantes se posent quant à la manière dont les humains resteront en bonne santé si jamais nous essayons de vivre sur d’autres planètes. Comme un manège dont la rotation semble douce jusqu'à ce qu'on essaie de descendre, les cycles terrestres ancrés dans nos cellules peuvent nous tirer dangereusement. "Ils nous lient vraiment à la Terre", a déclaré Partch.

Mais elle imagine pouvoir ajuster la dynamique de CLOCK, BMAL1 ou de l'un de leurs nombreux partenaires afin que les voyageurs de l'espace ne tombent pas malades à cause d'horloges endommagées. La nature offre une certaine inspiration : une mutation de CRY1 découverte dans le laboratoire de Michael Young à l'Université Rockefeller prolonge le cycle circadien des humains d'environ 40 minutes, condamnant ses porteurs à un cycle de sommeil perpétuellement incompatible sur Terre. Partch note que ce serait le moment idéal pour vivre sur Mars.

Partch constate que sa voix lui fait encore plus défaut ces jours-ci. Elle est satisfaite du clone de sa voix généré par l'IA qu'elle a obtenu, mais elle a quand même réduit ses apparitions et ses déplacements. Son absence aux réunions d’horloge circadienne est visible pour ses collègues, admirateurs et amis. La chronobiologie moderne s'appuie sur les contributions scientifiques des lauréats du prix Nobel et d'autres pionniers célèbres, mais aussi sur les détails structurels qu'elle a mis en lumière. « Il y a là-bas un monde beaucoup plus riche », a déclaré Gardner. "Et Carrie Partch est celle qui nous a donné ça."

Dans le salon de Partch, alors que le brouillard se lève pour accueillir la soirée, elle et moi parlons de l'écrivaine Ursula Le Guin, dont la fiction était souvent préoccupée par le temps. Dans son roman Les dépossédés, Le Guin a écrit sur la nécessité de mettre le temps de votre côté, d'organiser votre vie de manière à ce que son passage vous mène dans la direction de votre choix. "Le truc, c'est de travailler avec le temps plutôt que contre lui", a-t-elle écrit., « c’est que ce n’est pas du gaspillage. Même la douleur compte.

"Avez-vous le temps de votre côté?" Je demande.

"Oui", dit Partch. "Oui, je pense que oui."