Wprowadzenie
Wszystkie zwierzęta, rośliny, grzyby i protisty – które wspólnie tworzą domenę życia zwaną eukariontami – mają genomy o szczególnej cechy, która intryguje badaczy od prawie pół wieku: ich geny są pofragmentowane.
W ich DNA informacja o tym, jak wytwarzać białka, nie jest ułożona w długie, spójne ciągi zasad. Zamiast tego geny są podzielone na segmenty z sekwencjami pośrednimi lub „intronami”, oddzielającymi eksony, które kodują bity białka. Kiedy eukarionty wyrażają swoje geny, ich komórki muszą wyciąć RNA z intronów i zszyć razem RNA z eksonów, aby zrekonstruować przepisy na ich białka.
Tajemnica, dlaczego eukarioty polegają na tym barokowym systemie, pogłębiła się wraz z odkryciem, że różne gałęzie drzewa genealogicznego eukariotów znacznie różniły się pod względem obfitości ich intronów. Na przykład geny drożdży mają bardzo mało intronów, ale geny roślin lądowych mają ich wiele. Introny stanowią prawie 25% ludzkiego DNA. Sposób, w jaki ewoluowała ta ogromna, zagadkowa zmienność częstotliwości intronów, od dziesięcioleci budzi debatę wśród naukowców.
Jednak odpowiedzi mogą w końcu pojawić się dzięki niedawnym badaniom elementów genetycznych zwanych intronerami, które niektórzy naukowcy uważają za rodzaj pasożyta genomowego. Te fragmenty DNA mogą wślizgnąć się do genomów i tam się namnażać, pozostawiając po sobie mnóstwo intronów. W listopadzie ubiegłego roku naukowcy przedstawili dowody na to, że intronery robiły to u różnych eukariontów w trakcie ewolucji. Co więcej, wykazali, że introny mogą wyjaśnić, dlaczego gwałtowny przyrost liczby intronów wydaje się być szczególnie powszechny w wodnych formach życia.
Ich odkrycia „mogą wyjaśnić ogromną większość przyrostu intronów” – powiedział Russa Corbetta-Detiga, starszy autor nowego artykułu i badacz genomiki ewolucyjnej na Uniwersytecie Kalifornijskim w Santa Cruz.
Zagadka genomów eukariotycznych
Ze względu na introny pokrywające ich DNA, gdyby geny eukariontów zostały przetłumaczone bezpośrednio na białka, powstałe cząsteczki byłyby zazwyczaj niefunkcjonalnymi śmieciami. Z tego powodu wszystkie komórki eukariotyczne są wyposażone w specjalne nożyce genetyczne zwane spliceosomami. Te kompleksy białkowe rozpoznają charakterystyczne sekwencje otaczające RNA intronu i usuwają je ze wstępnych transkryptów RNA aktywnych genów. Następnie łączą razem segmenty kodujące z eksonów, aby wytworzyć informacyjne RNA, które można przetłumaczyć na działające białko.
(Kilka prokariontów również ma introny, ale mają sposoby na ich obejście, które nie wymagają spliceosomów. Na przykład niektóre z ich intronów „samoskładają się” i automatycznie usuwają się z RNA.)
Nie wiadomo, dlaczego dobór naturalny u eukariontów faworyzował introny, które musiały zostać usunięte przez spliceosomy. Ale kluczem może być to, że takie introny pozwalają na alternatywny splicing, zjawisko, które dramatycznie zwiększa różnorodność produktów, które mogą powstać z pojedynczego genu. Kiedy RNA intronu jest wycinane, sekwencje RNA eksonu można połączyć w nową kolejność, aby utworzyć nieco inne białka, wyjaśnił Corbett-Detig.
Pomimo wpływu intronów na biologię i złożoność genetyczną organizmów eukariotycznych, ich ewolucyjne pochodzenie pozostaje niejasne. Od czasu odkrycia intronów w 1977 roku badacze rozwinęli liczne teorie na temat pochodzenia tych inwazyjnych sekwencji. Zidentyfikowano kilka mechanizmów, które mogły tworzyć introny, i wszystkie z nich mogły przyczynić się do powstania niektórych intronów u eukariontów. Ale trudno powiedzieć, który z nich, jeśli którykolwiek z nich, mógłby wyjaśnić, skąd pochodzi większość intronów.
Co więcej, tajemnica związana z pochodzeniem intronów pogłębia się tylko w świetle skrajnych różnic w tym, gdzie introny pojawiają się w eukariotycznym drzewie życia. Niektóre linie rodowe są z nimi szczególnie obciążone w sposób, który wskazuje na nagłe zalewanie intronami podczas ich ewolucyjnej historii. Kiedy badasz drzewo życia i ile intronów znajduje się na każdym końcu drzewa, Corbett-Detig powiedział: „Możesz dość szybko zorientować się, że muszą istnieć pewne gałęzie, w których absolutna tona intronów wyewoluowała jednocześnie”.
Jedno z możliwych wyjaśnień tych wybuchowych napływów intronów wiąże się z niezwykłym rodzajem elementu genetycznego znanego jako introner. Po raz pierwszy opisany w 2009 roku w jednokomórkowych zielonych algach Mikromonas, intronery pojawiły się następnie w genomach niektórych innych alg, niektórych gatunków grzybów, maleńkich organizmów morskich zwanych bruzdnicami i prostych bezkręgowców zwanych osłonicami.
Charakterystyczną cechą intronerów jest to, że tworzą introny. Intronery kopiują i wklejają się w odcinki kodującego DNA, które oferują odpowiednie miejsce splicingu. Następnie idą dalej, pozostawiając po sobie specyficzną sekwencję intronu otoczoną miejscami splicingowymi, które dzielą kodujący DNA na dwa eksony. Ten proces można powtórzyć na masową skalę w całym genomie. Na przykład u grzybów intronery wydają się odpowiadać za większość przyrostu intronów w ciągu co najmniej ostatnich 100,000 XNUMX lat.
Wprowadzenie
Jak introny to osiągają, stało się jasne w 2016 r., kiedy naukowcy odkryli, że intronery w dwóch gatunkach alg mają silne podobieństwa do transpozonów DNA, członków większej rodziny elementów genetycznych zwanych elementami transpozycyjnymi lub „skaczącymi genami”. Transpozony wstawiają również ogromną liczbę swoich kopii do genomów.
Podobieństwa między intronerami i transpozonami silnie sugerowały możliwe rozwiązanie zagadki pochodzenia większości intronów. Intronery mogą powodować wybuch intronów w genomach w dużych ilościach, co może wyjaśniać przerywany wzór ich pojawiania się u różnych eukariotów. Haczyk polegał na tym, że introny występowały tylko w kilku organizmach.
„Czy ktoś szukał gdzie indziej?” — zapytał Landena Gozashtiego, który prowadził badania nad genomiką ewolucyjną w Santa Cruz, kiedy przeczytał badanie glonów z 2016 roku. Spojrzenie na literaturę naukową wykazało, że żadna grupa nie opublikowała żadnych danych na temat intronerów w innym miejscu wśród eukariontów. Gozashti, obecnie na Uniwersytecie Harvarda, Corbett-Detig i ich współpracownicy postanowili temu zaradzić.
Podstępni, liczni najeźdźcy
Zespół systematycznie skanował ponad 3,300 genomów z całej różnorodności eukariotów – od owiec przez sekwoje po orzęski protistów. Użyli szeregu filtrów obliczeniowych, aby zidentyfikować potencjalne intronery, szukając intronów o bardzo podobnych sekwencjach i usuwając fałszywe alarmy. W końcu znaleźli tysiące intronów pochodzi z intronerów w 175 z tych genomów, około 5% całości, z 48 różnych gatunków.
Pięć procent może wydawać się małym kawałkiem eukariotycznego tortu. Ale w miarę jak mutacje gromadzą się w intronerach z biegiem czasu, podobieństwa sekwencji między kopiami pogarszają się, aż nie można już stwierdzić, że pochodzą z tego samego źródła. Linie ewolucyjne wielu żyjących obecnie gatunków mogły doświadczyć powodzi intronów, ale jakikolwiek napływ intronów, który miał miejsce ponad kilka milionów lat temu, byłby niewykrywalny. Wynik 5% sugeruje zatem, że intronery mogą być znacznie bardziej wszechobecne.
Jako pasożyty genomowe intronery mogły odnieść sukces dzięki ukryciu. Dobry pasożyt nie może zwracać na siebie zbytniej uwagi. Jeśli introner zakłóca aktywność genu, w którym się zagnieździł, może zaszkodzić organizmowi żywiciela, a dobór naturalny może całkowicie usunąć genomowego pasożyta. Tak więc te elementy nieustannie ewoluują, aby być „tak neutralne, jak to tylko możliwe” w swoim wpływie, powiedział Walentyna Peona, genomik porównawczy z Uniwersytetu w Uppsali.
Gozashti, Corbett-Detig i ich współpracownicy odkryli, jak biegli intronerzy wymykają się spod radaru, kiedy oszacowali wydajność splicingu intronerów, co odzwierciedla ich zdolność do unikania zakłócania funkcji genów gospodarza. „Intronery są w rzeczywistości łączone lepiej niż inne introny” – powiedział Gozashti. „Te rzeczy stały się w tym naprawdę dobre”.
Połączenie wodne
Praca Gozashtiego i jego współpracowników dowiodła, że intronery nie są równomiernie rozmieszczone wśród eukariontów. Na przykład prawdopodobieństwo pojawienia się intronerów w genomach organizmów wodnych jest ponad sześć razy większe niż w organizmach lądowych. Co więcej, prawie trzy czwarte genomów gatunków wodnych, które zawierają intronery, zawiera wiele rodzin intronerów.
Corbett-Detig, Gozashti i ich współpracownicy uważają, że ten wzór można wyjaśnić poziomym transferem genów, przeniesieniem sekwencji genetycznej z jednego gatunku do drugiego. Te niekonwencjonalne transfery genów mają zwykle miejsce w środowiskach wodnych lub w przypadkach bliskich powiązań międzygatunkowych, na przykład między żywicielami a pasożytami. Saima Shahid, biolog roślin z Oklahoma State University.
Środowiska wodne mogą zachęcać do poziomego transferu genów ponieważ środowisko wodne może stać się zupą kwasów nukleinowych wydzielanych przez niezliczone gatunki. Organizmy jednokomórkowe wiosłują w tym gulaszu, więc łatwo im pobrać obce DNA, które może zostać włączone do ich własnego. Ale nawet znacznie bardziej złożone gatunki wielokomórkowe składają jaja lub zapładniają je w wodzie, stwarzając możliwości przeniesienia DNA do ich linii.
Wprowadzenie
Klemens Gilbert, genomik ewolucyjny z Uniwersytetu Paris-Saclay, uważa, że wodne nastawienie intronerów jest echem tego, co jego grupa odkryła w przypadku horyzontalnych transferów genów. W 2020 roku ich praca ujawniła prawie 1,000 różnych transferów poziomych obejmujących transpozony, które wystąpiły w ponad 300 genomach kręgowców. Zdecydowana większość tych transferów miała miejsce u ryb teleosta, powiedział Gilbert.
Jeśli introny dostają się do żywicieli głównie poprzez poziome transfery genów w środowiskach wodnych, może to wyjaśniać nieregularne wzorce dużych przyrostów intronów u eukariontów. Corbett-Detig powiedział, że organizmy lądowe prawdopodobnie nie będą miały takich samych wybuchów intronów, ponieważ transfer poziomy występuje wśród nich znacznie rzadziej. Przeniesione introny mogą przetrwać w genomach przez wiele milionów lat jako trwałe pamiątki po życiu przodków w morzu i fatalnym starciu ze zręcznym pasożytem genomowym.
Intronery działające jako obce, inwazyjne elementy w genomach mogą być również wyjaśnieniem, dlaczego wstawiają introny tak nagle i wybuchowo. Mechanizmy obronne, których genom może użyć do stłumienia odziedziczonego ciężaru transpozonów, mogą nie działać w przypadku nieznanego elementu genetycznego przybywającego drogą transferu poziomego.
„Teraz ten element może oszaleć w całym genomie” – powiedział Gozashti. Nawet jeśli intronery są początkowo szkodliwe, naukowcy wysuwają hipotezę, że presja selekcyjna może wkrótce je okiełznać, wycinając je z RNA.
Chociaż poziomy transfer genów i intronery mają wspólne połączenie ze środowiskiem wodnym, odkrycia nie wskazują jeszcze definitywnie, skąd pochodzą introny. Jednak odkrycie powszechnego wpływu intronerów kwestionuje niektóre teorie dotyczące ewolucji genomów - zwłaszcza genomów eukariotycznych.
Pogłosy w Hostii
Wszechobecność niedawnego przyrostu intronów może działać jako przeciwwaga dla niektórych pomysłów dotyczących ewolucji złożoności genomu. Jeden przykład obejmuje teorię ewolucji intronów opracowaną przez Michael Lynch z Arizona State University w 2002 r. Modele sugerują, że w przypadku gatunków o małych populacjach lęgowych dobór naturalny może być mniej skuteczny w usuwaniu nieprzydatnych genów. Lynch zaproponował, że gatunki te będą zatem miały tendencję do gromadzenia w swoich genomach stert niefunkcjonalnych śmieci genetycznych. Natomiast gatunki o bardzo dużych populacjach lęgowych w ogóle nie powinny uzyskiwać wielu intronów.
Ale Gozashti, Corbett-Detig i ich współautorzy stwierdzili coś przeciwnego. Niektóre morskie protisty z gigantycznymi populacjami lęgowymi miały setki lub tysiące intronerów. Natomiast intronery były rzadkie u zwierząt i nieobecne u roślin lądowych — obie grupy o znacznie mniejszych populacjach lęgowych.
Ewolucyjny wyścig zbrojeń między inwazyjnymi elementami genetycznymi a gospodarzem może przyczynić się do powstania bardziej skomplikowanego genomu. Elementy pasożytnicze są w „stałym konflikcie” z elementami genetycznymi należącymi do żywiciela, wyjaśnił Gozashti, ponieważ konkurują o przestrzeń genomową. „Wszystkie te ruchome elementy nieustannie napędzają się nawzajem, aby ewoluować” – powiedział.
Rodzi to pytanie, co zyski intronów oznaczały dla funkcjonalnej biologii organizmów, w których wystąpiły.
Cedrik Feschotte, biolog molekularny z Cornell University, podejrzewa, że interesujące byłoby porównanie dwóch blisko spokrewnionych gatunków, z których tylko jeden doświadczył roju intronów w najnowszej historii ewolucji. Porównanie może pomóc odkryć, w jaki sposób napływ intronów może sprzyjać pojawianiu się nowych genów. „Ponieważ wiemy, że wprowadzenie intronów może również ułatwić wychwytywanie dodatkowych egzonów – czyli zupełnie nowych rzeczy” – powiedział.
Podobnie Feschotte uważa, że obfitość intronów może pomóc w napędzaniu ewolucji rodzin genów, które mogą się szybko zmieniać. Wypchane nowymi intronami geny te mogłyby dokooptować nową zmienność, którą umożliwił alternatywny splicing.
Takie szybko ewoluujące geny są szeroko rozpowszechnione w przyrodzie. Na przykład jadowite gatunki często muszą remiksować złożone koktajle peptydów w swoich jadach na poziomie genetycznym, aby przystosować się do różnych ofiar lub drapieżników. Zdolność układu odpornościowego do generowania nieskończenie różnorodnych receptorów molekularnych zależy również od genów, które mogą szybko zmieniać układ i rekombinować.
Peona ostrzega jednak, że chociaż intronery mogą przynosić organizmowi korzyści, mogą być też całkowicie neutralne. Powinni być uważani za „niewinnych, dopóki nie zostanie im udowodniona wina pełnienia funkcji lub czegokolwiek innego”.
„Jedną z następnych rzeczy jest spojrzenie na dane metagenomiczne w celu znalezienia przypadku, który naprawdę jest wyraźnym transferem poziomym z dokładnie tymi samymi intronerami u dwóch różnych gatunków” – powiedział Corbett-Detig. Znalezienie tego elementu układanki pomogłoby w rozwinięciu pełnej historii pochodzenia większości intronów eukariontów.
Irina Arkhipowa, genetyk zajmujący się ewolucją molekularną z Laboratorium Biologii Morskiej Uniwersytetu w Chicago, chce dowiedzieć się więcej o tym, jak intronery rozprzestrzeniają się w genomie na tak dużą skalę. „Po prostu nie pozostawia śladu enzymu, który był odpowiedzialny za ten ogromny wzrost mobilności – to tajemnica” – powiedziała. „Zasadniczo musisz go złapać na gorącym uczynku, gdy wciąż się porusza”.
Dla Gozashtiego odkrycie intronerów w tak szerokiej gamie eukariotów jest lekcją, jak podejść do fundamentalnych pytań dotyczących natury życia eukariotycznego: myśl szeroko. Badania często koncentrują się na skrawku bioróżnorodności reprezentowanym przez zwierzęta i rośliny lądowe. Ale aby zrozumieć ważne wzorce informacji genomowej leżące u podstaw całego życia, „musimy zsekwencjonować więcej różnorodności eukariotycznej, więcej linii protistycznych, w przypadku których nie wiemy nic o ich ewolucji” – powiedział. „Gdybyśmy tylko badali rośliny lądowe i zwierzęta, nigdy byśmy nie znaleźli intronerów”.
Uwaga edytora: Gozashti jest doktorantem w laboratorium Hopi Hoekstra, który zasiada w radzie doradczej ds. Quanta.
- Dystrybucja treści i PR oparta na SEO. Uzyskaj wzmocnienie już dziś.
- Platoblockchain. Web3 Inteligencja Metaverse. Wzmocniona wiedza. Dostęp tutaj.
- Źródło: https://www.quantamagazine.org/how-a-dna-parasite-may-have-fragmented-our-genes-20230330/
- :Jest
- ][P
- $W GÓRĘ
- 000
- 1
- 100
- 2016
- 2020
- a
- zdolność
- O nas
- nieobecny
- bezwzględny
- obfitość
- wykonać
- Konto
- Gromadź BTC
- osiągnięty
- w poprzek
- działać
- aktywny
- działalność
- faktycznie
- przystosować
- Dodatkowy
- doradczy
- Rada doradcza
- Wszystkie kategorie
- alternatywny
- Chociaż
- wśród
- i
- zwierzęta
- Inne
- odpowiedź
- ktoś
- nigdzie
- zjawić się
- podejście
- właściwy
- SĄ
- Arizona
- na około
- przyjazd
- AS
- Stowarzyszenie
- At
- Uwaga
- autor
- automatycznie
- Gruntownie
- BE
- bo
- stają się
- za
- Korzyści
- Ulepsz Swój
- pomiędzy
- stronniczość
- Duży
- biologia
- deska
- gałęzie
- szerokość
- Bringing
- szeroko
- budować
- ciężar
- by
- California
- nazywa
- CAN
- zdobyć
- walizka
- zapasy
- Spowodować
- Komórki
- Wiek
- pewien
- wyzwanie
- zmiana
- Chicago
- jasny
- jaśniejsze
- Zamknij
- dokładnie
- Kodowanie
- ZGODNY
- koledzy
- zbiorowo
- jak
- wspólny
- porównać
- porównanie
- rywalizować
- całkowicie
- kompleks
- kompleksowość
- skomplikowane
- połączenie
- za
- stale
- zawierać
- nieustannie
- kontrast
- przyczyniły
- mógłby
- Stwórz
- Tworzenie
- tnący
- dane
- debata
- lat
- Obrona
- zależy
- Pochodny
- opisane
- rozwinięty
- różne
- bezpośrednio
- odkrycie
- odrębny
- dystrybuowane
- inny
- Różnorodność
- DNA
- robi
- domena
- nie
- dramatycznie
- rysować
- napęd
- jazdy
- podczas
- każdy
- przegapić
- efektywność
- wydajny
- Jajka
- element
- Elementy
- gdzie indziej
- osadzone
- powstanie
- wschodzących
- włączony
- nieskończoność
- Środowisko
- środowiska
- Równie
- wyposażony
- szacunkowa
- Parzyste
- wydarzenia
- wszystko
- dowód
- ewolucja
- ewoluuje
- ewoluowały
- ewoluuje
- przykład
- doświadczony
- Wyjaśniać
- wyjaśnione
- wyjaśnienie
- ekspresowy
- skrajny
- ułatwiać
- rodzin
- członków Twojej rodziny
- Cecha
- kilka
- Postać
- filtry
- W końcu
- Znajdź
- znalezieniu
- i terminów, a
- Ryba
- Skupiać
- W razie zamówieenia projektu
- obcy
- formularze
- znaleziono
- rozdrobniony
- Częstotliwość
- od
- pełny
- funkcjonować
- funkcjonalny
- fundamentalny
- Wzrost
- zyskuje
- Zyski
- Generować
- generujący
- genomika
- GitHub
- Go
- dobry
- absolwent
- wspaniały
- Zielony
- Zarządzanie
- Grupy
- winny
- Pół
- ręka
- zdarzyć
- się
- Ciężko
- szkodliwy
- harvard
- Harvard University
- Have
- ciężki
- pomoc
- wskazówki
- historia
- posiada
- Poziomy
- gospodarz
- gospodarze
- W jaki sposób
- How To
- Jednak
- http
- HTTPS
- olbrzymi
- człowiek
- Setki
- pomysły
- zidentyfikowane
- zidentyfikować
- Układ odpornościowy
- ważny
- in
- Rejestrowy
- Zwiększenia
- wpływ
- napływ
- Informacja
- początkowo
- przykład
- zamiast
- zainteresowany
- ciekawy
- interweniować
- angażować
- IT
- JEGO
- samo
- Klawisz
- Uprzejmy
- Wiedzieć
- Wiedząc
- znany
- laboratorium
- Kraj
- duży
- większe
- Nazwisko
- pozostawiając
- lekcja
- poziom
- życie
- lekki
- lubić
- Prawdopodobnie
- literatura
- długo
- dłużej
- Popatrz
- poszukuje
- Większość
- robić
- wiele
- masywny
- średni
- Użytkownicy
- Messenger
- może
- milion
- miliony
- mobilność
- modele
- Cząsteczkowa
- jeszcze
- Ponadto
- większość
- ruch
- przeniesienie
- wielokrotność
- Tajemnica
- Naturalny
- Natura
- prawie
- Potrzebować
- Neutralny
- Nowości
- Następny
- listopad
- z naszej
- liczny
- miejsce
- of
- oferta
- Oklahoma
- on
- ONE
- Szanse
- naprzeciwko
- zamówienie
- Inne
- własny
- Papier
- Parallels
- szczególnie
- Wzór
- wzory
- osobliwy
- procent
- stały
- zjawisko
- kawałek
- sztuk
- Rośliny
- plato
- Analiza danych Platona
- PlatoDane
- punkt
- populacje
- możliwy
- potencjał
- przedstawione
- bardzo
- głównie
- wygląda tak
- produkować
- Produkty
- promować
- zaproponowane
- Białko
- Białka
- okazały
- Sprawdzony
- zapewniać
- opublikowany
- puzzle
- Magazyn ilościowy
- pytanie
- pytania
- szybko
- Wyścig
- radar
- podnosi
- zasięg
- szybko
- RZADKO SPOTYKANY
- Czytaj
- powód
- niedawny
- rozpoznać
- odzwierciedla
- związane z
- pozostał
- Remix
- usunąć
- Usunięto
- usuwanie
- powtórzony
- reprezentowane
- Badania naukowe
- badacz
- Badacze
- odpowiedzialny
- dalsze
- wynikły
- ujawniać
- RNA
- Powiedział
- taki sam
- Święty
- Skala
- waga
- naukowy
- Naukowcy
- SEA
- Segmenty
- wybór
- selektywny
- senior
- Sekwencja
- Serie
- służy
- zestaw
- kilka
- Share
- owca
- powinien
- pokazać
- podobny
- podobieństwa
- Prosty
- ponieważ
- pojedynczy
- witryna internetowa
- Witryny
- SIX
- trochę inny
- potknięcie się
- mały
- mniejszy
- So
- kilka
- Źródło
- Typ przestrzeni
- specjalny
- specyficzny
- dzielić
- Dzieli
- Rozpościerający się
- Stan
- Stealth
- Nadal
- Historia
- silny
- strongly
- student
- Studiował
- badania naukowe
- Badanie
- Następnie
- sukces
- taki
- nagły
- system
- Brać
- zespół
- ziemski
- że
- Połączenia
- Informacje
- ich
- Im
- sami
- w związku z tym
- Te
- rzeczy
- Myśli
- tysiące
- Przez
- poprzez
- czas
- czasy
- typ
- do
- już dziś
- razem
- Tona
- także
- Kwota produktów:
- CAŁKOWICIE
- Wyśledzić
- przenieść
- przeniesione
- transfery
- ogromny
- Obrócony
- zazwyczaj
- wszechobecny
- dla
- zasadniczy
- zrozumieć
- nieznany
- uniwersytet
- University of California
- University of Chicago
- posługiwać się
- różnorodny
- Naprawiono
- Ostrzega
- Woda
- Droga..
- sposoby
- webp
- Co
- który
- Podczas
- KIM
- szeroki
- Szeroki zasięg
- szeroko
- rozpowszechniony
- będzie
- w
- Praca
- pracujący
- by
- lat
- You
- zefirnet